quantification par PCR de borrelia burgdorferi

Quantification par PCR des organismes Borrelia burgdorferi dans les tissus canins sur une
période de 500 jours après la période d’infection.
Straubinger RK. 2000.
James A. Baker Institute for Animal Health, College of Veterinary Medicine, Cornell University, Ithaca, New York
14853, USA. rks4@cornell.edu
L’infection à Borrelia burgdorferi chez des chiens "beagle" fut étudiée quantitativement avec des biopsies de peau et des
échantillons de sang à 4 et 2 semaines d’intervalle, respectivement, sur une période de 500 jours. Par la suite, 25
échantillons de tissu de chaque chien furent collectés pour des analyses plus poussées. En commençant au 120ème jour
après la piqûre de tique, 12 chiens furent traités avec des antibiotiques (azithromycine, ceftriaxone, ou doxycycline)
pendant 30 jours consécutifs. Quatre chiens ne reçurent aucun traitement antibiotique. La quantification de l’ADN de B.
burgdorferi fut réalisée avec un Système de Détection de Séquence ABI Prism 7700 avec des amorces oligonucléotide
et sonde fluorescente étiquetée pour amplifier spécifiquement le fragment du gène Ops1 de la souche N40 de la B.
burgdorferi. Les 16 chiens devinrent infectés par B. burgdorferi après la piqûre de tique. Dans les échantillons de
biopsie de peau, le nombre de spirochètes atteint un pic au jour 60 après l’infection (<1.6 x 10(6) organismes par 100
microgrammes d’ADN extrait), au moment où des signes d’arthrite se développèrent chez 11 des 16 chiens, et décrurent
à des niveaux presque indétectables durant les 6 mois suivants. Le nombre d’organismes B. burgdorferi détectés dans
les échantillons de biopsie de peau étaient inversement corrélés avec les niveaux d’anticorps mesurés lors du test
ELISA. Le traitement antibiotique réduisit le montant d’ADN du spirochète détectable dans les tissus de peau par un
facteur 1000 ou plus. A la fin de l’expérimentation, l’ADN de B. burgdorferi fut détectable à de faibles niveaux (10(2) à
10(4) organismes par 100 microgrammes d’ADN extrait) dans de multiples tissus quel que soit le traitement. Toutefois,
davantage de tissus étaient positifs chez les chiens non traités que chez les chiens traités, et les échantillons de tissus des
chiens non traités étaient aussi positifs par culture. Seuls 1.6% des 576 échantillons de sang de tous les chiens étaient
positifs à B. burgdorferi par PCR.

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